- Правова система ipLex360
- Законодавство
- Рекомендації
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР
ГЛАВНОЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ УПРАВЛЕНИЕ
УТВЕРЖДАЮ
Заместитель Главного
санитарного врача МЗ СССР
В.Е.Ковшило
20.10.1976 N 1514-76
Методические рекомендации об определении свободного формальдегида в биосредах методом тонкослойной хроматографии
ВВЕДЕНИЕ
Формальдегид H*COH, молекулярный вес 30,03. Бесцветный газ с резким запахом. Порог восприятия запаха 0,2 мг/куб.м. Температура плавления 92 град.С, температура кипения - 21 град.С. Хорошо растворим в воде; 35-40% водный раствор формальдегида называется формалином. Он легко полимеризуется с образованием параформальдегида, легко конденсируется с аммиаком, аминами и фенолами. Формальдегид находит большое применение при производстве полимерных материалов на основе мочевино-формальдегидной, феноло-формальдегидной и др. смол.
Для определения формальдегида в биосредах в литературе описан метод, основанный на способности формальдегида восстанавливать окраску бесцветного раствора фуксинсернистой кислоты [1]. Однако он оказался недостаточно чувствительным при определении H*COH в органах подопытных животных, подвергавшихся длительной затравке формальдегидом на уровнях, соответствующих его выделению из полимерных материалов. По этой же причине оказался неудовлетворительным метод, описанный в работе [2].
Настоящий метод предназначен для определения формальдегида в печени, почках, легких, мозге подопытных животных. Извлечение формальдегида из органов животных делалось так, как описано в работе [1], синтез формдимедона по прописи, представленной в руководстве [3], условия хроматографирования и количественного определения формдимедона разработаны авторами.
Принцип метода
1. Метод основан на извлечении формальдегида из органов, его взаимодействии с димедоном (5,5-диметилдигидрорезорцином) с последующим выделением продукта взаимодействия (формдимедона) в тонком слое сорбента. В качестве алюента применяется хлороформ. Проявление пластины осуществляется хлороформенным раствором йода.
2. Открываемый минимум - 0,2 мкг в пробе.
3. Веществ, мешающих определению, не установлено.
Реактивы, растворы
1. Соляная кислота (d=1,19), "хч", ГОСТ 3118-67; Ін; 0,1н р-ры.
2. Димедон, "ч", ГОСТ 6622-53, перекристаллизованный; 5% спиртовый р-р, свежеприготовленный.
3. Гидроокись натрия, "хч", ГОСТ 4328-66; 0,1н; 0,05н и 20% р-ры.
4. Спирт этиловый, ректификат, ГОСТ 5962-67; перегнанный.
5. Вода, бидистиллат.
6. Бромфеноловый синий, "чда", ГОСТ ТУ 6-03-311-70.
7. Ацетат натрия, "ч", ТУ 6-09-246-70.
8. Нитрат серебра, "хч", ГОСТ 1277-63; 0,1н р-р.
9. Хлороформ, "хч", ГОСТ 3160-51.
10. Трихлоруксусная кислота, "ч", МРТУ 6-09-2299-65; 5% р-р.
11. Йод, "чда", ГОСТ 4159-64.
12. Крахмал растворимый, для йодометрии, ГОСТ 10163-62.
13. Формалин медицинский, ГФ-10.
14. Буферный р-р: смешивают 2 объема Iн р-ра ацетата натрия с 1 объемом Iн р-ра HCl, pH=4,0.
15. Бромфеноловый синий: 0,1 г индикатора растворяют в 3 мл 0,05н p-pa NaOH в мерной колбе емкостью 250 мл, добавляют горячей бидистиллированной воды, остывший р-р взбалтывают в мерной колбе, затем доводят до метки водой и хорошо перемешивают.
16. Проявляющий р-р: 0,5% р-р йода в хлороформе и 1% р-р крахмала.
17. Синтез формдимедона: в стакан вносят 5 мл 4% р-ра
формальдегида, прибавляют 0,5 мл 5% спиртового р-ра димедона,
подкисляют несколькими каплями 0,1н р-ра HCl в присутствии
бромфенолового синего. Затем прибавляют несколько капель 0,1н р-ра
NaOH до изменения окраски в красно-фиолетовую и 5 мл буферного
р-ра. Содержимое стакана оставляют стоять на 12 часов, после чего
фильтруют через стеклянный фильтр с пористой пластинкой N 4.
Осадок промывают бидистиллированной водой до отрицательной реакции
на ион хлора (проба с р-ром AgNO ) и сушат до постоянной массы в
3
течение 4,5 часов при температуре 100 град.С.
18. Стандартный р-р формдимедона концентрацией 50 мкг/мл готовится обычным способом.
Приборы и посуда
1. Центрифуга.
2. Форвакуумный или водоструйный насос.
3. Стеклянная ловушка.
4. Стеклянные пластинки размером 9х12 см.
5. Поглотитель Полежаева на шлифе с оттянутым концом.
................Перейти до повного тексту