Відповідно до статей 6, 11 Закону України "Про захист населення від інфекційних хвороб" , керуючись пунктом 9 Положення про Державну санітарно-епідеміологічну службу України , затвердженого Указом Президента України від 06.04.2011 № 400, враховуючи ускладнену епідемічну ситуацію з поліомієліту в Україні та з метою організації роботи вірусологічних лабораторій щодо моніторингу ентеровірусів, в тому числі поліовірусів,

1. Затвердити примірні стандартні операційні процедури з відбору, доставки, прийому, обробки та підготовки проб довкілля та біологічного матеріалу для виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів (далі - Примірні стандартні операційні процедури), що додаються:

Примірна стандартна операційна процедура з обробки проб води поверхневих водойм для виділення проб води поверхневих водойм для виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з відбору і доставки проб поверхневих водойм для виділення ентеровірусів, в числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з обробки проб стічної води для виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з відбору і доставки проб спинно-мозкової рідини для виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з відбору і доставки проб сироватки крові для виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з підготовки назофарингіального змиву до виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з обробки проб питної води (РЧВ) для виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з відбору і доставки проб питної води для виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з підготовки проб фекалій до виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з відбору, доставки та прийому проб фекалій від контактних осіб для виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з відбору і доставки проб назофарингеальних змивів для виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з виділенням поліовірусів та інших ентеровірусів на культурі клітин;

Примірна стандартна операційна процедура з пасажування та підтримки культури L20b;

Стандартна операційна процедура з підготовки секційних проб до виділення ентеровірусів, в тому числі поліовірусів;

Примірна стандартна операційна процедура з пасажування та підтримки культури RD.

2. Керівникам державних установ, що входять до сфери управління Держсанепідслужби України:

2.1. у термін до 19 лютого 2016 року розробити та затвердити відповідні стандартні операційні процедури;

2.2. інформацію про затвердження стандартних операційних процедур надати до Управління соціально-гігієнічного моніторингу та аналізу ризиків Держсанепідслужби України (Фенюк О.В.) до 25 лютого 2016 року.

3. Контроль за виконанням цього наказу залишаю за собою.

1. З доставленої проби відбираємо 2 л зразка поверхневої води.

2. За допомогою pH-метра вимірюємо pH води при кімнатній температурі.

3. Доводимо pH до 5,0 за допомогою розчинів 1M HCl або NaOH.

4. До проби додаємо 4 г ентеросгелю.

5. Ретельно змішуємо та залишаємо відстоюватися в холодильнику на 24 год.

6. На наступний день зливаємо надосад, а осад, що утворився розливаємо у флакони чи центрифужні пробірки.

7. Центрифугуємо 20 хв. при 2000 об/хв.

8. Переливаємо надосад у флакон (4 мл) та перевіряємо pH. Спочатку доводимо pH до 7,0-7,2 і розливаємо в 2 мікропробірки по 500 мкл для проведення ІФА на ВГА та RV. Пробірки підписуємо відповідними номерами та кладемо в морозильну камеру (-20° C). У залишку елюату (3 мл) доводимо pH до 5,0.

9. У пеніциліновий флакон з елюатом додаємо 150 мкл хлороформу (з розрахунку 500 мкл хлороформу на 10 мл води).

10. Струшуємо та залишаємо на 30 хв. при кімнатній температурі.

11. Центрифугуємо 20 хв. при 2000 об/хв.

12. У боксі ОБЕРЕЖНО піпеткою (не торкаючись кульки хлороформу) переносимо надосад у стерильний пеніциліновий флакончик та зберігаємо в морозильній камері.

13. Заражаємо культуру клітин.

1. Проби відбираються тільки у стерильний посуд, роботу проводять в халаті та гумових рукавичках, ємність з матеріалом закривають щільно гумовими корками, обклеюють лейкопластиром.

2. Вода поверхневих водойм об'ємом 3,0 л відбирається з мостів, помостів, плавзасобів за допомогою батометра з глибини 10-15 см від поверхні води.

3. Проби маркують, вказують населений пункт, точку відбору, назву проби, дату (число, місяць, рік) відбору. До проби додається направлення зразка.

4. Зразки доставляються у вірусологічну лабораторію ДУ "Обласний лабораторний центр Держсанепідслужби України" у сумках-холодильниках, або у пінопластових коробках з сухим або вологим льодом в максимально короткі терміни (не більше 6-ти годин).

5. Після отримання проби працівники лабораторії негайно розпаковують її в визначеному для цього місті, де є ємність для сміття, тампони з спиртом і паперові рушники.

6. Розпаковують матеріал 2 працівники, один з яких працює в рукавичках, перевіряє цілісність і герметичність проби, а інший проводить реєстрацію зразка.

7. Інформацію на етикетці проби звіряють з записами в бланку направлення. Кожній пробі присвоюється реєстраційний номер, який вноситься в журнал реєстрації та в направлення від проби. Цей номер ставлять на ємкостях з пробою, і надалі він проставляється на всіх ємкостях з цією пробою при всіх маніпуляціях в лабораторії.

8. В лабораторії вода підлягає дослідженню в перші години з моменту надходження. При необхідності її можна зберігати при температурі +4° C протягом доби, а при температурі 20° C і більш тривалий час.

1. З доставленої проби відбираємо 1 л зразка стічної води.

2. За допомогою pH-метра вимірюємо pH води при кімнатній температурі.

3. Доводимо pH до 5,0 за допомогою розчинів 1M HCl або NaOH.

4. До проби додаємо 1 г ентеросгелю.

5. Ретельно змішуємо та залишаємо відстоюватися в холодильнику на 24 год.

6. На наступний день зливаємо 1ад осад, а осад, що утворився розливаємо у флакони чи центрифужні пробірки.

7. Центрифугуємо 20 хв при 2000 об/3ад.

8. Переливаємо 3ад осад у флакон (4 мл) та перевіряємо pH. Спочатку доводимо pH до 7,0-7,2 і розливаємо в 2 мікропробірки по 500 мкл для проведення ІФА на ВГА та RV. Пробірки підписуємо відповідними номерами та кладемо в морозильну камеру(-20° C).

9. У пеніциліновий флакон з елюатом додаємо 150 мкл хлороформу (з розрахунку 500 мкл хлороформу на 10 мл води).

10. Струшуємо та залишаємо на 30 хв при кімнатній температурі.

11. Центрифугуємо 20 хв. при 2000 об/4ад.

12. У боксі ОБЕРЕЖНО піпеткою (не торкаючись кульки хлороформу) переносимо 4ад осад у стерильний пеніциліновий флакончик та зберігаємо в морозильній камері.

13. Заражаємо культуру клітин.

1. Спинно-мозкова рідина відбирається стерильно в кількості 2-3 мл в стерильну пробірку.

2. Зразки нумерують, обгортають гігроскопічним матеріалом, поміщають в пластиковий пакет та заклеюють. Матеріал поміщається в контейнер для транспортування з холодовим елементом.

3. У направленні на дослідження вказується номер зразку, ПІБ, вік, стать, адреса хворого, дата останньої вакцинації від поліомієліту, серія використаної вакцини та термін її придатності, дата захворювання, діагноз або клінічні прояви, дата відбору матеріалу, підпис та прізвище відповідальної особи. Направлення поміщається у файл, а потім в контейнер для транспортування.

4. Матеріал доставляється у вірусологічну лабораторію ДУ "Обласний лабораторний центр Держсанепідслужби України" (адреса) в день відбору, якщо це не можливо, то не пізніше 48-72 год (зберігається матеріал у морозильній камері при температурі -18°С; -20°C).

5. Після отримання проби працівники лабораторії негайно розпаковують її у визначеному для цього місці, де є ємність для сміття, тампони з спиртом і паперові рушники.

6. Розпаковують матеріал два працівники, один з яких працює в рукавичках, перевіряє цілісність і герметичність проби, а інший проводить реєстрацію зразка.

7. Інформацію на етикетці проби звіряють з записами в бланку направлення. Кожній пробі присвоюється реєстраційний номер, який вноситься в журнал реєстрації та в направлення від проби. Цей номер ставлять на ємкостях з пробою, і надалі він проставляється на всіх ємкостях з цією пробою при всіх маніпуляціях в лабораторії.

8. В лабораторії проба підлягає дослідженню в перші години з моменту надходження. При необхідності її можна зберігати при температурі +4° C протягом доби, а при температурі -20° C і тривалий час.

1. Сироватка крові відбирається двічі стерильно в кількості 0,3 мл в стерильний епендорф. Перша проба відбирається в перші 7 днів захворювання, друга - на 21-28 день захворювання.

2. Зразки нумерують, обгортають гігроскопічним матеріалом, поміщають в пластиковий пакет та заклеюють. Матеріал поміщається в контейнер для транспортування з холодовим елементом.

3. У направленні на дослідження вказується номер зразку, П.І.Б/, вік, стать, адреса хворого, дата останньої вакцинації від поліомієліту, серія використаної вакцини та термін її придатності, дата захворювання, діагноз або клінічні прояви, дата відбору матеріалу, підпис та прізвище відповідальної особи. Направлення вкладається у файл, а потім - в контейнер для транспортування.

4. Матеріал доставляється у вірусологічну лабораторію ДУ "Обласний лабораторний центр Держсанепідслужби України" (адреса) в день відбору, якщо це неможливо, то зберігається у морозильній камері при температурі -18° C, -20° C не більше 48-72 год.

5. Після отримання проби працівники лабораторії негайно розпаковують її у визначеному для цього місці, де є ємність для сміття, тампони з спиртом і паперові рушники.

6. Розпаковують матеріал два працівники, один з яких працює в рукавичках, перевіряє цілісність і герметичність проби, а інший проводить реєстрацію зразків.

7. Інформацію на етикетці проби звіряють із записами в бланку направлення. Кожній пробі присвоюється реєстраційний номер, який вноситься в журнал реєстрації та в направлення відповідної проби. Цей номер ставлять на ємкостях з пробою, і надалі він проставляється на всіх ємкостях з цією пробою при всіх маніпуляціях в лабораторії.

8. В лабораторії матеріал підлягає дослідженню в перші години з моменту надходження. В разі необхідності його можна зберігати при температурі +4° C протягом доби, а при температурі -20° C і тривалий час.

1. Ретельно струшуємо пробірку чи флакон з тампоном, зануреним у вірусну транспортну рідину.

2. Стерильним пінцетом щільно віджимаємо тампон по стінці пробірки (флакона) і викидаємо.

3. Переносимо рідину у два флакони з підписом.

4. Додаємо антибіотики (100 МЕ/мл пеніциліна і 100 мкг/мл стрептоміцина).

5. Один флакон залишаємо для зберігання при -20° C, інший використовують для дослідження на культурі клітин поміщаємо в холодильник при температурі 0 - +8° C.

1. З доставленої проби відбираємо 10 л зразка питної води.

2. За допомогою pH-метра вимірюємо pH води при кімнатній температурі.

3. Доводимо pH до 5,0 за допомогою розчинів 1М HCl або NaOH.

4. До проби додаємо 20 г. ентеросгелю.

5. Ретельно змішуємо та залишаємо відстоюватися в холодильнику на 24 год.

6. На наступний день зливаємо надосад, а осад, що утворився розливаємо у флакони чи центрифужні пробірки.

7. Центрифугуємо 20 хв. при 2000 об/хв.

8. Переливаємо надосад у флакон (4 мл) та перевіряємо pH. Спочатку доводимо pH до 7,0-7,2 і розливаємо в 2 мікропробірки по 500 мкл для проведення ІФА на ВГА та RV. Пробірки підписуємо відповідними номерами та кладемо в морозильну камеру.

9. У пеніциліновий флакон з елюатом додаємо 150 мкл хлороформу (з розрахунку 500 мкл хлороформу на 10 мл води).

10. Струшуємо та залишаємо на 30 хв. при кімнатній температурі.

11. Центрифугуємо 20 хв. при 2000 об/хв.

12. У боксі "ОБЕРЕЖНО" піпеткою (не торкаючись кульки хлороформу) переносимо надосад у стерильний пеніциліновий флакончик та зберігаємо в морозилці.

13. Заражаємо культуру клітин.